乙脑病毒prME蛋白与鼠GM—CSF编码基因的融合构建与表达
目的构建乙脑病毒prME蛋白与鼠GM-CSF融合基因重组子并建立稳定细胞表达株。方法套式-RT—PCR法从BALB／c鼠脾组织获取GM＋CSF编码基因，用限制性内切酶从含乙脑病毒wME蛋白基因重组子获取prME蛋白基因，定向克隆至同-真核表达载体pcDNA3．1（＋）不同酶切位点，构建重纽子pJME／GM—CSF并经酶切及DNA测序分析。脂质体法将pJME／GM—CSF转染中华仓鼠卵巢（CHO）N胞。Western blot法检测转染的CHO细胞中融合蛋白表达。结果pJME／GM—CSF经BamHI／EcoRI和BamHI／NotI酶切释出的插入子片段（2001bp、2472bp）分别与预期结果相符合。所编码的融合蛋白相对分子量（Mr）为85×103。结论pJME／GM-CSF成功构建，转染的CHO细胞可稳定表达融合蛋白。
脑炎病毒、日本、病毒蛋白质类、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子、CHO细胞
R512.32(传染病)
国家自然科学基金30471547;辽宁省自然科学基金20042072;辽宁省教育厅高校科研基金05IA98;辽宁省教育厅高校科研基金L2010589
2011-09-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
706-709
