突变DJ-1转基因小鼠模型的建立
目的 探讨DJ-1~(L166P)突变基因在帕金森病发生中的作用.方法 构建pcDNA3.1-myc-his-DJ-1~(L166P)真核表达载体,利用显微注射方法将DJ-1~(L166P)基因片段(约3.9 kb)导入BDF1小鼠受精卵雄原核并移植到同期受孕的ICR假孕母鼠输卵管中,对产出仔鼠的鼠尾组织DNA进行聚合酶链反应和Southern blot检测,对Southern blot鉴定阳性的转基因小鼠进行逆转录聚合酶链反应和Western blot检测.结果 共产生20只子代小鼠,1号和7号为DJ-1~(L166P)转基因阳性小鼠.1号转基因小鼠大脑、小脑、肝、肺、肾、睾丸有不同程度的DJ-1 mRNA表达,均高于正常对照小鼠,但只有大脑中DJ-1 mRNA的表达水平显著高于正常对照小鼠(P<0.05);7号转基因小鼠只有肝、肺组织中有DJ-1 mRNA表达,也高于正常对照小鼠,但差异无统计学意义.只有1号小鼠大脑有His标签蛋白的表达.结论 成功获得1只DJ-1~(L166P)基因突变转基因小鼠模型,为课题的下一步实验研究打下良好的基础.
DJ-1基因、帕金森症、转基因小鼠
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R-332(医学研究方法)
辽宁省重点实验室专项基金资助项目辽科发[2005]36号
2013-02-28(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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