10.3969/j.issn.0258-4646.2008.03.002
小鼠CD36基因片段合成、表达及GST融合蛋白的表达和纯化
目的 获取小鼠CD36基因片段,并高效表达和纯化GST-CD36融合蛋白.方法 设计合成CD36的基因功能片段,测序后,通过酶切克隆至表达载体pGEX-5X-2,构建重组表达载体,并导入E.coli BL21宿主茵中,异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达重组的GST融合蛋白,亲和层析纯化表达产物,SDS-PAGE进行分析鉴定.结果 获得小鼠CD36基因片段,测序结果与GenBank的基因序列一致,重组GST融合蛋白经SDS-PAGE分析,在相对分子量28.5kDa处,出现特异性蛋白条带,重组蛋白经GST亲和层析柱纯化后,得到了高纯度的融合蛋白.结论 合成小鼠CD36基因片段,并在E.coli BL21中高效表达,亲和层析后获得高纯度GST-CD36融合蛋白.
CD36基因、基因合成、表达、纯化
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R135.2(劳动卫生)
国家自然科学基金资助项目30500232;高等学校博士学科点专项科研基金资助项目20060159006;辽宁省自然科学基金资助项目20072102
2008-08-11(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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