抗NI-35重组单链抗体表达载体的构建与融合表达

摘要：

目的:重新设计并人工合成抗NI-35重组单链抗体(anti-NI-35-scFv)的cDNA克隆,构建其表达载体,在原核系统中实现初步表达.方法:根据抗NI-35抗体的轻链重链序列,重新设计适于在大肠杆菌中表达的基因片段,经退火、复性连接成目的片段后,克隆到克隆载体pUC-18中,经全自动序列分析仪测序证实,再亚克隆至表达载体pET-28a(+),转化大肠杆菌BL21,诱导表达.结果:合成的基因序列与设计的仅差一个碱基,目的基因连接方向及阅读框架正确;SDS-PAGE检测显示,表达出相对分子量31kDa的融合蛋白,并得到了良好的生物活性.结论:抗NI-35重组单链抗体基因表达载体的构建和表达,为深入研究其应用于神经系统的损伤和修复奠定了基础.

关键词：抗NI-35重组单链抗体、基因合成、表达

所属期刊栏目：32

分类号：Q789(基因工程（遗传工程）)

在线出版日期：2003-11-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：398-400,425