猪肺炎支原体Mhp-1株的分离鉴定及其全基因组测序分析

摘要：

为了分离与鉴定引起的猪群疑似支原体性肺炎的病原体,本实验收集了 20份病死猪肺脏病变组织,采用猪肺炎支原体(Mhp)和猪鼻支原体(Mhr)特异性引物进行PCR鉴定、分析培养特性、颜色变化单位(CCU)测定、传代培养后扩增16S rRNA基因并测序分析等,并进一步采用BLAST分析分离菌16S rRNA基因序列的同源性,采用邻接法构建16S rRNA基因的系统进化树,对该分离株MLST分型、全基因组测序和毒力基因预测.结果显示,20份临床样品仅3份样品为Mhp单阳性,接种KM2液体培养基后仅1份生长良好,颜色规律性变黄;接种KM2固体培养基培养7 d后呈现特异性"煎蛋样"的菌落形态;瑞氏姬姆萨染色结果可见环状、点状、丝状、两级状等形状且大小不等的菌体形态,传12代后经特异性PCR检测结果为Mhp单阳性,表明该分离株可以稳定传代,且无Mhr污染;该分离株在KM2培养基上为1 ×107 CCU/mL;16S rRNA基因序列比对结果显示该分离株与GenBank中登录的Mhp菌株ES-2(CP038641.1)同源性达100％.以上结果确定本研究分离出一株Mhp,并将其命名为Mhp-1.16S rRNA基因系统发育树分析结果显示,分离株Mhp-1与国外猪源Mhp分离株F7.2(KY264125.1)处于同一分支,亲缘关系最近;MLST分型结果显示Mhp-1分离株属于ST184型;全基因组测序获得序列大小为0.91 Mb,与已报道的Mhp基因组大小基本一致;毒力基因预测结果显示其存在EF-Tu、Lttp、P216、P102、P46、P97、PDH-B、Capsule、HlyA等毒力因子编码基因.本研究进一步丰富了 Mhp的研究数据,为规模化猪场猪支原体性肺炎的防控提供参考数据.

关键词：猪肺炎支原体、分离与鉴定、全基因组测序、毒力基因

所属期刊栏目：46

分类号：S852.62(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家重点研发计划;国家自然科学基金

在线出版日期：2024-09-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：630-635