山羊IL-10蛋白在金黄色葡萄球菌感染免疫反应中调节机制的研究

摘要：

为探究金堂黑山羊白介素-10蛋白(IL-10)在金黄色葡萄球菌感染免疫反应中的调节机制,本研究构建了重组表达质粒pET32a-IL-10,经诱导后表达纯化获得山羊重组IL-10蛋白(rIL-10),SDS-PAGE和western blot鉴定结果显示,山羊IL-10在大肠杆菌中以包涵体形式表达,重组蛋白大小约为27 ku.每组5只通过金黄色葡萄球菌感染小鼠试验研究rIL-10的免疫调节作用,将15只SPF小鼠随机分为A、B和C组,A组为正常对照组,B和C组腹腔注射500μL金黄色葡萄球菌(1×108 cfu/mL),感染24 h后C组腹腔注射200μg/kg rIL-10,感染48 h后检测各组小鼠血清学指标和3种炎症因子在其6种组织中的转录水平,结果显示,B组小鼠血清丙二醛MDA含量极显著高于A和C组(p<0.01),总抗氧化能力T-AOC和谷胱甘肽过氧化物GSH-PX酶活性极显著低于A和C组(p<0.01);IL-1β基因转录水平在B组小鼠心、肝、肺和肾中极显著高于A组(p<0.01),在C组小鼠心、肝、脾和肺中低于B组(p<0.01),在脾和肾中低于A组(p<0.01);炎症因子IL-2在B组小鼠肝、脾、肺和小肠中的转录水平高于A组(p<0.05或p<0.01),在C组小鼠肝、脾、肺、肾和小肠中低于B组(p<0.05或p<0.01),在心、脾和肾中显著低于A组(p<0.05);TNF-α基因转录水平在B组小鼠的小肠中高于A组(p<0.05),在C组小鼠心、脾、肺和小肠中低于B组(p<0.05或p<0.01),在心、脾和肺中低于A组(p<0.05或p<0.01).上述结果表明,山羊rIL-10通过调节血清MDA含量、T-AOC和GSH-PX活性,以及下调炎症因子基因转录水平,改善因金黄色葡萄球菌引起的小鼠免疫因子紊乱.本研究为深入探究山羊IL-10作用及机制提供科学依据.

关键词：白介素-10、原核表达、金黄色葡萄球菌、炎症因子、山羊

所属期刊栏目：42

分类号：S852.61(动物医学（兽医学）)

资助基金：四川省肉羊创新团队防疫岗位;农业农村部农业重大技术协同推广计划试点四川省肉羊高效生产配套技术推广应用

在线出版日期：2021-01-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1167-1171