鸭瘟病毒疫苗株UL44.5和UL44基因间隔区作为复制非必需区的鉴定

摘要：

为探寻鸭瘟病毒(DEV)基因组中适合外源基因插入的复制非必需区,本研究利用本实验室前期建立的DEV疫苗株多片段拯救系统,结合E/T克隆技术、LR克隆技术将含有红色荧光蛋白(RFP)表达框架的目的片段,定向插入到含DEV基因组复制非必需区的粘粒中,该位点位于DEV基因组UL区的UL44.5和UL44之间,拯救获得了重组病毒(rDEV).通过PCR和荧光显微镜鉴定该重组病毒.结果 显示,经PCR扩增,rDEV可以扩增到预期目的片段,观察可见红色荧光,表明RFP基因能够在重组病毒中稳定存在并正确表达;生长动力学结果显示,重组病毒在CEF中的增殖效率与DEV疫苗株无显著差异.将rDEV以105 TCID50的剂量免疫SPF鸭后,DEV攻毒保护试验结果显示,rDEV和亲本株DEV活疫苗对SPF鸭的保护效率均为100％.本研究筛选到DEV基因组中的一个可供外源基因插入的位点,为以DEV为载体构建相关重组疫苗研制提供依据.

关键词：重组鸭瘟病毒、复制非必需区、DEV拯救系统

所属期刊栏目：41

分类号：S852.65(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家重点研发计划项目2017YFD0500805

在线出版日期：2019-12-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：795-799