环形泰勒虫SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR方法的建立及应用

摘要：

为建立一种快速、敏感检测牛环形泰勒虫的方法,本研究根据GenBank中登录的牛环形泰勒虫Tams1基因序列,设计合成1对特异性引物,通过优化反应条件,建立了检测牛环形泰勒虫SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法.研究结果显示,该方法可以特异地检测牛环形泰勒虫,而对牛巴贝斯虫、反刍动物艾立希体和弓形虫检测均为阴性;该方法的灵敏度可达到180拷贝/μL,比常规PCR敏感10倍;组内和组间变异系数均小于1.0％.对15份临床血液样品和20只璃眼蜱进行检测,SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR和常规PCR的阳性检出率分别为42.86％和28.57％.本研究建立的SYBR G-reen Ⅰ荧光定量PCR检测方法具有特异性强、敏感性高的特点,可准确、高效检测牛环形泰勒虫,为牛环形泰勒虫病防控提供技术支持.

关键词：牛环形泰勒虫、Tams1基因、SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR、建立及应用

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分类号：S852.7(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家质检总局科技计划项目2016IK277;浙江省重大科技专项重点农业项目2015C02044

在线出版日期：2019-03-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：53-57