牛轮状病毒抗原捕获ELISA方法的建立与应用

摘要：

为建立牛轮状病毒(BRV)抗原检测方法,本研究以BRV VP6蛋白的多克隆抗体为捕获抗体、VP7蛋白的G6/G10共享型单克隆抗体(MAb)为检测抗体,建立了BRV抗原捕获ELISA方法.特异性试验结果显示,该ELISA方法与牛肠道病毒、牛呼肠孤病毒、牛细小病毒、牛传染性鼻气管炎病毒、牛副流感病毒3型、牛病毒性腹泻病毒以及阿卡斑病毒无交叉反应.敏感性试验结果显示,本研究建立的ELISA方法最低可以检出104.2 TCID50病毒,而商品化ELISA试剂盒和RT-PCR方法的最低检出限分别为10486 TCID5.和103.36 TCID50病毒.该方法组内和组间的变异系数均小于10％,表明重复性良好.应用该ELISA方法对67份牛腹泻粪便样品进行检测,结果显示BRV阳性率为18％,与商品化试剂盒和RT-PCR方法的符合率均为100％.本研究建立的抗原捕获ELISA方法可以用于BRV的规模化检测,为BRV的病原流行病学调查研究提供了有效的技术手段.

关键词：牛轮状病毒、抗原捕获ELISA、检测、单克隆抗体

所属期刊栏目：40

分类号：S852.65(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家科技计划课题2012BAD12B03-3

在线出版日期：2019-03-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1142-1146