猫杯状病毒VP1蛋白单克隆抗体的制备及其抗原表位的鉴定

摘要：

为制备抗猫杯状病毒(FCV)衣壳蛋白VP1的单克隆抗体(MAb)及鉴定其表位,本研究以原核表达的重组VP1-E蛋白(aa427～aa524)免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞(SP2/0)进行融合制备杂交瘤细胞;以纯化的FCV-2280病毒粒子作为检测抗原,采用间接ELISA检测方法筛选杂交瘤细胞株,分析杂交瘤细胞所分泌的抗体亚型、中和活性及所识别的抗原表位等.结果表明,获得两株稳定分泌抗FCV VP1-E MAbs的杂交瘤细胞E2F1和E2F6,抗体均为IgG1亚型,轻链为κ链.杂交瘤细胞分泌的抗体无中和活性.Western blot结果显示,两种抗体可以特异性识别FCV-2280,表明其针对的抗原表位为线性表位.两株MAb识别VP1-E序列均为467YICGSLQRAWG477.生物信息学分析显示该抗原表位在FCVVP1蛋白中相对保守.该MAb为建立特异性强、灵敏度高的FCV的检测方法奠定基础.

关键词：猫杯状病毒、VP1-E蛋白、原核表达、单克隆抗体

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分类号：S852.65(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家重点研发项目2016YFD0501001;中央级公益性科研院所基本科研业务费专项1610302017012

在线出版日期：2018-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1017-1021