10.3969/j.issn.1008-0425.201701002
稳定表达马属动物SAMHD1蛋白的U937细胞系的建立及其抗病毒活性初步研究
为研究马属动物SAMHD1的抗病毒活性,本研究构建了稳定表达马SAMHD1 (eqSAMHD1)、驴SAMHD1 (doSAMHD1)的U937细胞系.利用pLPCX慢病毒表达载体构建重组质粒pLPCX-doSAMHD 1-HA和pLPCX-eqSAMHD 1-HA.将重组质粒和假病毒包装重组质粒(pCgp和pVSV-G)共转染于293T细胞中,制备表达SAMHD1的假病毒,将其感染人急性单核细胞白血病细胞系U937,利用嘌呤霉素筛选,建立了稳定表达doSAMHD1和eqSAMHD1的U937细胞系.经western blot鉴定,该细胞系能够稳定表达doSAMHD1和eqSAMHD1蛋白.将人类免疫缺陷病毒(HIV)和马传染性贫血病毒(ELAV)的假病毒感染该细胞系,结果显示表达eqSAMHD1和doSAMHD1的细胞系均能够显著抑制HIV假病毒复制,限制倍数分别为17~19倍和14~18倍;两种细胞系也能够抑制EIAV假病毒复制,限制倍数分别为3~4倍和2~3倍.该细胞系的建立为进一步评价和研究马属动物SAMHD1的抗病毒机制奠定了基础.
马、驴、SAMHD1、U937细胞系、HIV-1、EIAV
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S852.65(动物医学(兽医学))
国家自然科学基金青年科学基金项目31300713;国家自然科学基金委员会优秀青年科学基金项目31222054
2018-03-02(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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