黄颡鱼源维氏气单胞菌Aha和gyrB基因双重PCR检测方法的建立

摘要：

为建立一种快速、准确检测黄颡鱼源维氏气单胞菌(A.veronii)的方法,本研究根据A.veronii菌株RC110724黏附素基因(Aha)和促旋酶B亚单位基因(gyrB)序列设计引物,经条件优化建立了A.veronii的双重PCR检测方法.结果显示该方法可以同时扩增出A.veronii 419 bp和745 bp两条特异性的片段,而对嗜水气单胞菌、迟缓爱德华菌、副溶血性弧菌、麦氏弧菌、荧光假单胞菌、金黄色葡萄球菌、柱状黄杆菌、肺炎克雷伯氏菌、无乳链球菌、舒伯特气单胞菌扩增结果为阴性;该方法对A.veronii标准株ATCC35624和RC110724基因组DNA和菌体检测下限分别为6.6× 10-3 ng/μL和3.2× 102 cfu/mL.利用建立的双重PCR方法对30份临床样品进行检测,结果与细菌传统分离鉴定符合率为100％.同时,双重PCR可以检出菌株RC110724人工感染的黄颡鱼肝、脾和肾组织中的细菌DNA,对肝和脾脏组织的样品检测效果最好.本研究建立的双重PCR检测方法特异性好,具有较高的检测灵敏性,可用于黄颡鱼等A.veronii感染病例的快速诊断和流行病学监测.

关键词：维氏气单胞菌、Aha基因、gyrB基因、双重PCR、检测

所属期刊栏目：39

分类号：S852.61(动物医学（兽医学）)

资助基金：重庆市生态渔业技术体系建设专项资金40800115、40800216;西南大学荣昌校区青年基金项目20700913;中央高校基本科研业务费专项资金资助项目XDJK2012C095

在线出版日期：2018-03-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：810-814