弓形虫酵母双杂交cDNA文库构建及与AMA1羧基端相互作用蛋白的筛选

摘要：

为筛选弓形虫AMA1基因羧基端(AMA1c)在弓形虫中的相互作用分子,本研究采用MatchmakerTMGold酵母双杂交系统,构建了弓形虫RH株酵母双杂交cDNA文库,文库滴度达到4.26×107 cfu/mL.以构建的pGBKT7-AMA1c诱饵质粒,使用PEG/LiAc法转化酵母菌株Y2H,利用表型筛选法检测AMA1c的自激活作用并进行酵母双杂交筛选,得到阳性克隆,根据序列比对分析结果,进一步进行共转化验证.结果表明,诱饵蛋白在酵母双杂交系统中具有无毒性和自激活作用,而且通过酵母双杂交筛选共得到13个与AMA1c蛋白相互作用的虫体蛋白.本研究结果为进一步研究AMA1c的功能奠定了基础.

关键词：弓形虫、AMA1羧基端、酵母双杂交、自激活

所属期刊栏目：36

分类号：S852.7(动物医学（兽医学）)

资助基金：兽医生物技术国家重点实验室基本科研业务费项目SKLVBP201306

在线出版日期：2014-04-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：201-204