绵羊痘病毒甘肃流行株糖蛋白基因ORF117的克隆及其原核表达

摘要：

以甘肃景泰疑似羊痘(SP)患病绵羊的皮肤组织中提取的总DNA为模板,经PCR扩增获得SP病毒(SPV)ORF117基因.测序后分析表明,该基因由591个核苷酸组成,编码196个氨基酸;将该基因克隆于pET32 载体中,构建重组表达质粒pET-ORF117,用IPTG在不同条件下诱导表达,确定其最佳表达条件.SDS-PAGE电泳分析表明,表达的融合蛋白分子质量为42 ku,主要以包涵体的形式存在.在IPTG浓度为0.1 mM、温度为37℃、诱导6 h时表达量最大,约占菌体蛋白的30%.Western blot试验表明,融合蛋白可被羊痘阳性血清识别,这为研究其在新型疫苗和诊断的研究奠定了基础.

关键词：绵羊痘病毒、ORF117基因、克隆、原核表达

所属期刊栏目：31

分类号：S852.654(动物医学（兽医学）)

资助基金：兰州市城关区农业科技攻关项目07-32;中国农业科学院兰州兽医研究所所长基金366

在线出版日期：2009-07-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：337-341