SARS冠状病毒PUP5蛋白的表达、纯化及鉴定

摘要：

经RT-PCR扩增了SARS冠状病毒(SARS-CoV)BJ01株的PU5基因(putative uncharacterized gene 5)的cDNA,将其克隆到原核表达载体pGEX-6P-1中,命名为pGEX-PU5,测序正确后将阳性质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,IPTG诱导表达,表达的融合蛋白命名为pGEX-PUP5,并用Glutathione SwpharoseTM 4B亲和层析柱对表达产物进行纯化,然后用PreScissionTM Protease酶对融合蛋白进行解离,获得PUP5蛋白,用抗SARS-CoV卵黄抗体IgY和GST-tag单克隆抗体分别对表达的目的蛋白做Western blot鉴定,证明所表达的蛋白具有免疫学活性.本研究应用原核表达系统表达了PUP5蛋白,为进一步解析该蛋白功能奠定了基础.

关键词：SARS冠状病毒、PUP5蛋白、表达

所属期刊栏目：28

分类号：S852.65+9.6(动物医学（兽医学）)

在线出版日期：2006-08-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：457-460,465