检测伪狂犬病病毒双抗体夹心间接ELISA方法的建立与应用

摘要：

以猪伪狂犬病病毒(PrV)Ea株特异性单克隆抗体576株为捕获抗体,纯化的抗PrV IgG为检测抗体,建立了检测PrV抗原的双抗体夹心ELISA方法.最佳反应条件为,单克隆抗体576株的包被浓度为12.2μg/mL,IgG的工作浓度为16.0μg/mL,对PrV的检测灵敏度达15.6 ng(0.156μg/mL),与乙型脑炎病毒(JEV)、猪瘟病毒(HCV)、猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)、猪细小病毒(PPV)和猪流感病毒(SIV)等无交叉反应.批间和批内变异系数较小,分别为6.39%和4.1%.应用本方法对人工感染PrV的40日龄仔猪组织进行检测,肺和脑PrV抗原检出率最高,其次是脾、心、肝和肌肉.应用该方法和PrV对159份临床样本进行平行检测,发现二者的符合率可达到77.4%,比PCR敏感.实验结果表明:双抗体夹心间接ELISA方法具有敏感性高、特异性强和重复性好的特点,可广泛应用于动物组织中PrV的检测.

关键词：双抗体夹心间接ELISA、单克隆抗体、猪伪狂犬病毒Ea株

所属期刊栏目：28

分类号：S852.65+5(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家重大科技攻关专项基金2002BA514A-18

在线出版日期：2006-04-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：220-225