鸡CD3γδ基因cDNA的克隆及其真核表达质粒的构建

摘要：

用Trizol提取4～6周龄白莱航鸡、伊莎鸡、固始鸡和隐性白羽鸡胸腺组织的总RNA,再用Oligo-dT纤维素富集mRNA后,用RT-PCR扩增出鸡CD3γδ基因cDNA.PCR产物切胶回收后连入T载体,序列分析发现伊莎鸡、固始鸡和隐性白羽鸡的CD3γδ cDNA比白莱航鸡多一个氨基酸,且在胞外区的一个区域有4个氨基酸的差异.将白莱航鸡的CD3γδ从T载体上切下连入pcDNA3.1(+),再将重组质粒pcDNA3.1-CD3转染COS-7细胞,用已知的抗鸡CD3的单克隆抗体测得转染细胞中CD3γδ分子的表达,这说明构建的真核表达质粒正确,为下一步用DNA免疫的手段研制抗鸡CD3的单克隆抗体以及研究鸡CD3分子的结构和功能打下了基础.

关键词：鸡、CD3、cDNA、真核表达

所属期刊栏目：28

分类号：Q785(基因工程（遗传工程）)

资助基金：全国高等学校优秀博士学位论文作者专项基金FANEDD:200358;江苏省六大人才高峰基金G2002-026

在线出版日期：2006-04-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：147-151