β-谷甾醇对类风湿性关节炎滑膜成纤维细胞功能的影响及机制

摘要：

目的 研究β-谷甾醇对类风湿性关节炎(RA)滑膜成纤维细胞MH7A功能的影响及其机制.方法 使用网络药理学筛选β-谷甾醇的作用靶点及治疗RA的靶点,两者取交集后进行拓扑分析寻找治疗RA的最关键靶点.用不同浓度(0、5、10、20、40 μmol/L)的β-谷甾醇处理MH7A细胞并用CCK-8法检测细胞活性,筛选β-谷甾醇的最适给药浓度.采用10 ng/mL肿瘤坏死因子(TNF-α)体外诱导MH7A细胞后,加入β-谷甾醇(最适给药浓度)处理.CCK-8法和EdU法检测细胞增殖能力;划痕实验和Transwell侵袭法分别检测细胞迁移及侵袭能力;酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测细胞上清液中白细胞介素1β(IL-1β)和IL-6的水平;qRT-PCR法和Western blot法分别检测过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)mRNA和蛋白表达水平.MH7A细胞转染PPARα小干扰RNA,并通过上述实验方法检测PPARα敲低后β-谷甾醇对MH7A细胞增殖、迁移、侵袭、炎症因子分泌及PPARα蛋白表达的影响.结果 PPARα是β-谷甾醇治疗RA的最关键靶点,β-谷甾醇的最适给药浓度为20 μmol/L.与模型组相比,β-谷甾醇组MH7A细胞活力显著降低、细胞增殖数显著减少(P＜0.05),细胞迁移率显著降低、细胞侵袭数显著减少(P＜0.05),IL-1β水平、IL-6水平均显著降低(P＜0.05),PPARα mRNA和蛋白表达水平均显著增加(P＜0.05).与阴性对照小干扰RNA组相比,敲低PPARα后细胞活力上升35.6%(P＜0.05),细胞增殖数、细胞迁移率和细胞侵袭数均显著增加(P＜0.05),IL-1β水平及IL-6水平均显著升高(P＜0.05).结论 β-谷甾醇可以抑制TNF-α诱导的MH7A细胞的增殖、迁移、侵袭和炎症因子分泌,其作用机制与激活PPARα通路有关.

关键词：β-谷甾醇、类风湿性关节炎、过氧化物酶体增殖物激活受体α、增殖、迁移、侵袭、炎症因子

所属期刊栏目：34

分类号：R965(药理学)

资助基金：河南省卫生健康委中医药传承与创新人才工程仲景工程中医药拔尖人才资助项目;河南省中医药科学研究专项课题

在线出版日期：2023-08-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1847-1852