人Müller细胞来源的外泌体对脂多糖刺激视网膜色素上皮细胞产生炎症因子的影响

摘要：

目的 研究人原代Müller细胞来源的外泌体(EXO)对脂多糖(LPS)刺激人视网膜色素上皮(RPE)细胞产生炎症因子的影响.方法 原代纯化培养人Müller和RPE细胞,通过免疫荧光鉴定RPE细胞,用试剂盒提取得到Müller细胞来源的EXO并通过透射电镜观察和Western印迹法进行鉴定.在无EXO培养基培养人RPE细胞后,分别采用100 ng/mL LPS刺激,不加或加入EXO(50 μg/mL),以不含EXO和LPS培养细胞为对照组,分别通过酶联免疫吸附试验(ELISA)测定和实时反转录聚合酶链反应(RT-PCR)研究RPE细胞产生炎症因子的变化.结果 人Müller细胞来源的提取物经透射电镜观察为圆形或半圆形囊泡,直径为30～100 nm,表达EXO特有标志物CD63和Flotillin-1.LPS组上清液中白介素1β(IL-1β)、IL-6、IL-8和肿瘤坏死因子α(TNF-d)的浓度分别为(333.89±41.51)、(404.67±13.88)、(1 557.11 ±317.08)、(466.78±39.34) μg/mL,EXO +LPS组分别为(214.11±18.14)、(318.12±34.73)、(1 170.37±244.15)、(319.73 ±41.39) μg/mL,2组比较差异有统计学意义(IL-1β:P ＜0.01;IL-6、IL-8:P＜0.05;TNF-α:P＜0.001).与LPS组相比,EXO +LPS组的相关基因表达受到抑制,其中IL-1β基因表达差异有统计学意义(P＜0.05),IL-8、CCL20和TNF-α差异有统计学意义(P＜0.001),CCL2与IL-6则组间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 成功获得Müller来源的EXO,其对LPS刺激RPE细胞产生炎症因子具有一定的调节作用.

关键词：外泌体、视网膜色素上皮、炎症因子

所属期刊栏目：17

分类号：R3 ;R73

资助基金：国家自然科学基金81200675,81470624

在线出版日期：2017-11-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：323-327