10.14166/j.issn.1671-2420.2017.04.003
紫外线C诱导的人晶状体上皮细胞中CRYAA表达的上升
目的 研究在紫外线照射下人晶状体上皮细胞(LEC)中晶状体蛋白的表达变化.方法 用波长为254 nm的紫外线C(UVC)照射LEC(包括原代细胞和细胞系),一定时间后收集照射后的细胞进行如下实验:①碘化丙啶(PI)染色和线粒体膜电位流式检测对细胞进行凋亡评估;②实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测CYRAA,CRYAB,CRYBB2基因的mRNA表达量;③免疫荧光染色检测CRYAA的蛋白表达;④焦磷酸测序检测CRYAA基因的启动子区域甲基化.结果 LEC在强度为25 μW/cm2的UVC照射0、10、20、30 min后立即做PI染色,结果显示:随着照射时间的增加,细胞凋亡率递增,分别为0、7%、33%和100%.LEC在UVC照射10 s并培养24 h后100%死亡;照射5 s并培养24 h后,部分凋亡,CRYAA基因表达量显著上调(>4倍),但是细胞传代后CRYAA基因表达量恢复正常水平.焦磷酸测序结果显示,CRYAA基因的启动子区甲基化水平无明显变化.结论 LEC在受到强度为25 μW/cm2的UVC照射10 s并继续培养24 h后死亡,照射5s并继续培养24h后,CRYAA基因表达上调,提示其抗氧化作用,但该上调不是通过CRYAA基因启动子甲基化改变来调控的.
白内障、紫外线、CRYAA、细胞凋亡
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R77;R39
国家自然科学基金81200668
2017-09-11(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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