外源性机械生长因子对大鼠骨骼肌卫星细胞生物学特性的影响
目的:研究机械生长因子(MGF)促离体培养的骨骼肌卫星细胞增殖的最佳浓度,并观察该浓度对细胞生长曲线、总蛋白及凋亡情况的影响.方法:选用雄性SD大鼠1只,无菌条件下取后肢肌肉,采用改进的两步酶消化法结合差速贴壁技术,分离及纯化骨骼肌卫星细胞.取第3代骨骼肌卫星细胞,分别采用终浓度为15、25、50、100、200 ng/ml的MGF进行干预,作为实验组;另以单纯加入100 μl生长培养基作为对照组,以加入100μl DMEM作为阴性对照组.同步化后,于培养24 h后加入CCK-8溶液.采用CCK-8比色法检测不同浓度MGF下细胞的增殖情况并筛选出最佳浓度后,绘制生长曲线,同时运用BCA法及Hoechst 33342、PI双染法测定最佳增殖浓度的MGF对卫星细胞蛋白合成及细胞凋亡的影响.免疫细胞化学法鉴定骨骼肌卫星细胞.结果:①终浓度为15、25、50、100 ng/ml的MGF均有促进骨骼肌卫星细胞增殖的作用(P＜0.01),其中25 ng/ml MGF促增殖作用最佳.②与对照组相比,MGF组细胞生长曲线左移,倍增时间、平台期均缩短.③与对照组相比,25 ng/ml MGF作用48 h即对骨骼肌卫星细胞有明显的增殖效果(P＜0.05);与对照组相比,25 ng/ml MGF作用骨骼肌卫星细胞48 h和72 h时,其总蛋白含量显著增加(P＜0.05);与对照组相比,25 ng/ml MGF作用72h、96h,骨骼肌卫星细胞的平均凋亡指数显著减小(P＜0.05).结论:①机械生长因子可促进体外培养的大鼠骨骼肌卫星细胞增殖,最佳浓度为25 ng/ml;②25 ng/ml MGF可以使骨骼肌卫星细胞提前进入平台期,缩短生长周期;③25ng/ml MGF可以抑制骨骼肌卫星细胞的凋亡.
机械生长因子、骨骼肌卫星细胞、增殖、生长曲线、凋亡指数
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R68;G80
上海市教委科研创新项目05IZ02;上海市第三期重点学科建设S30802
2013-01-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共6页
330-335
