10.11665/j.issn.1000-5048.2016010?
人 Th17细胞体外诱导分化条件的研究
通过密度梯度离心法从人新鲜血液中分离获得人外周血单核细胞（PBMCs），比较分析加入不同细胞极化因子（IL-1β、IL-6、TGF-β和 IL-23）以及诱导不同时间（1，2，3，4 d）对 Th17细胞分化的影响，利用流式细胞仪、ELISA 方法以及Q-PCR 技术考察相关指标，评估人体外 Th17细胞的分化水平。研究表明，IL-1β、IL-6、TGF-β和 IL-23单独均能对 Th17细胞的分化起到促进作用，联用 IL-1β、IL-6、TGF-β和 IL-23时可使 Th17细胞体外分化效率达到最佳。随着诱导时间的延长， Th17细胞分化水平逐渐升高，培养3 d 时达到峰值，继续增加培养时间分化率反而出现降低。最终确立人 Th17细胞体外分化的最佳诱导条件：在加入 CD3抗体和 CD28抗体的基础上，同时加入 IL-1β、IL-6、TGF-β以及 IL-23共同培养人 PBMCs 3 d 可有效地刺激人 Th17细胞的分化，并且流式细胞检测 Th17细胞分化率达到近10％，ELISA 检测细胞上清液中 IL-17A含量达到近3 ng／mL，Q-PCR 方法分析 IL-17 mRNA 基因表达升高达15倍，此方案具有操作简便、周期短、成本低廉等优点，为 Th17细胞的功能研究及相关疾病治疗药物的研发建立了有效的检测平台。
人外周血单核细胞、Th17 细胞、体外、诱导分化
R392;Q254
国家自然科学基金资助项目No．81202450，No．81273426；国家教育部博士点基金资助项目No．20120096110007；江苏省高校研究生科技创新计划资助项目No．CXZZ13＿0331This study was supported by the National Natural Science Foundation of China81202450,81273426;the Ph．D．Programs Foundation of Ministry of Education of China20120096110007;the Innovative Scientific Research Team Fund of Jiangsu ProvinceCXZZ13＿0331
2016-04-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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