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10.11665/j.issn.1000-5048.20150618

透明质酸单克隆抗体的制备及免疫分析方法的建立

引用
将1-氰基4-二甲胺吡啶四氟硼酸盐(CDAP)活化后的透明质酸(HA)与牛血清白蛋白(BSA)共价偶联制备完全抗原BSA-HA,纯化后免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备HA特异性单克隆抗体,考察单抗的生物学特性,并建立HA定量免疫分析方法——间接竞争ELISA法.研究表明,完全抗原BSA-HA免疫BALB/c小鼠后,能诱导HA特异性抗体的分泌;经细胞融合、选择性培养、筛选和亚克隆,获得一株稳定分泌HA特异性抗体的杂交瘤细胞8B6,其腹水抗体效价达1:256 000以上,亲和常数为6.71×109 mol-1,独特型为IgG1;以10.0 ng/mL HA包被酶标板,1.0% BSA为封闭剂,建立HA间接竞争ELISA法,其线性范围介于0.01~10.0 μg/mL,特异性好、灵敏度高.

透明质酸、单克隆抗体、间接竞争ELISA、免疫分析

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TQ323

国家"重大新药创制"科技重大专项资助项目2012ZX09502001-004;江苏高校优秀科技创新团队资助项目;This study was supported by China National Key High-Tech Innovation Project for the R&D of Novel Drugs2012ZX09502001-004;the Innovative Scientific Research Team Fund of Jiangsu Province

2016-01-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

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740-744

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中国药科大学学报

1000-5048

32-1157/R

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2015,46(6)

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