10.11665/j.issn.1000-5048.20130619
可溶性重组人IL23R-CHR在大肠埃希菌中的表达、纯化及活性研究
利用人白细胞cDNA文库体外扩增获得hIL23R-CHR目的基因,克隆至原核表达载体pET22b/pET28a/pET32a,转化BL21(DE3)宿主菌,并对工程菌的表达方式(直接表达、可溶性标签融合表达、分泌表达及包涵体表达)及表达量进行比较,确立pET 32a为表达载体,经IPTG诱导表达后通过镍亲和柱分离纯化融合蛋白Trx-IL23R-CHR,肠激酶4℃酶切Trx-IL23R-CHR分子24 h,上镍柱进行二次纯化,获得纯度达90%以上的rhIL23R-CHR分子.亲和力实验证实:原核重组表达的hIL23 R-CHR与hIL23在物质的量比为1∶1时可以有效结合,小脑HE病理切片提示rhIL23R-CHR分子对实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)模型鼠有一定的保护作用.
IL-23、hIL23R-CHR、原核表达、分离纯化
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Q786(基因工程(遗传工程))
国家自然科学基金资助项目81202450;中央高校基本科研业务费专项资金资助项目JKPZ2013013;This study was supported by the National Natural Science Foundation of China81202450;the Fundamental Research Funds for the Central UniversitiesJKPZ2013013
2015-07-29(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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