灰毡毛忍冬抑制表皮生长因子受体激酶活性及活性部位UPLC-Q-TOF/MS分析

摘要：

应用高通量药物筛选技术,筛选发现具有表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)激酶抑制活性的中药提取物,同时采用超高效液相色谱与串联四极杆飞行时间质谱仪联用技术(UPLC-Q-TOF/MS)对其活性部位进行分析和鉴别.灰毡毛忍冬药材经石油醚渗滤、乙醇提取、乙酸乙酯萃取和水煎煮后,得到4个相应的提取部位.采用均相时间分辨荧光(HTRF)法检测抑制EGFR激酶活性,于波长为620和665 nm处测定荧光信号的变化及信号值,计算提取物对EGFR激酶的抑制率.采用Acquity UPLC BEH C18色谱柱,以0.1％甲酸水溶液(A)-乙腈(B)为流动相梯度洗脱,210～ 400 nm扫描,使用ESI离子源,在正离子模式下采集数据.结果显示,灰毡毛忍冬的乙酸乙酯部位显示较强的EGFR激酶抑制活性,IC50为2.027 μg/mL.Q-TOF/MS测定的一级、二级质谱信息及结合文献鉴定灰毡毛忍冬乙酸乙酯提取物中1 1个化合物,其中7个分别是:咖啡酸(caffeic acid),七叶内酯(esculetin),槲皮素(quercetin),3,5-二咖啡酰奎尼酸(3,5-O-dicaffeoylquinicacid),扁柏黄酮(hinoki flavone),绿原酸(chlorogenic acid),β-谷甾醇(β-sitosterol).3,5-二咖啡酰奎尼酸、咖啡酸、扁柏黄酮为灰毡毛忍冬的主要成分,灰毡毛忍冬中含有的酚酸类和黄酮类化合物可能是抑制EGFR激酶活性的主要成分.

关键词：EGFR激酶抑制剂、高通量筛选、灰毡毛忍冬、提取物、有效成分、UPLC-Q-TOF/MS

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分类号：R917(药物基础科学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目81274013;国家自然科学基金重点项目资助81130069;人事部留学人员择优资助项目2009-2012;国家“重大新药创制”科技重大专项资助项目2011ZX09307-002-01;This study was supported by the National Natural Science Foundation of China81274013;the National Natural Science Foundation in Key Projects81130069;The Personnel Department Students Studying Abroad Preferred-Aid Project2009-2011;China National Key High-Tech Innovation Project for the R&D of Novel Drugs2011ZX09307-002-01

在线出版日期：2015-07-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：526-530