人胰淀素类似物普兰林肽体外活性测定方法的建立

摘要：

建立体外人胰淀素类似物普兰林肽活性测定的方法,为普兰林肽及其制剂的质量控制提供可靠的细胞检测方法.将L6细胞培养并分化成有明显肌管的成熟骨骼肌细胞,采用葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法(GOD-POD)检测普兰林肽对高糖培养环境下骨骼肌细胞葡萄糖吸收的影响.结果显示,在1×10-9～1×10-5 mol/L的浓度范围内,普兰林肽能显著增加分化后的L6细胞的糖吸收量,在16h达到最大值.普兰林肽浓度的负对数(x)与细胞糖吸收增加量(y)间呈现出良好的线性关系(y=-4.750x+ 59.54,R2 =0.991 9).应用本实验建立的方法检测了市售普兰林肽醋酸盐注射剂的活性,结果显示1×10-6、1×10-7和1×10-8 mol/L的普兰林肽注射剂作用于分化的L6细胞16h,细胞的糖吸收增加率为(61.89±9.54)％,(43.68±10.06)％和(33.30±13.03)％(P＜0.01)；与单用胰岛素组对比,普兰林肽与胰岛素联合使用能显著提高分化后的L6细胞的糖吸收量(P＜0.05),与普兰林肽注射剂的临床使用结果一致.本实验为普兰林肽的活性测定提供了一种稳定可靠的细胞替代模型.

关键词：普兰林肽、人胰淀素类似物、L6细胞、活性测定

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分类号：R587.1(内分泌腺疾病及代谢病)

资助基金：国家"重大新药创制"科技重大专项资助项目2011ZX09401-307;广东省教育部产学研结合项目资助2009B090300091;中小企业科技创新引导资金计划项目2010Q-P012

在线出版日期：2015-07-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：355-360