重组抑肽酶的生产工艺研究

摘要：

目的:优化融合表达抑肽酶基因工程菌的发酵条件,分离纯化抑肽酶.方法:设计3因素3水平的正交实验,考查玉米粉浓度、诱导时间和诱导剂乳糖浓度对菌体生长及蛋白表达的影响;在30 L发酵罐中进行中试放大试验;菌体经超声破壁和离心得到融合蛋白包涵体,经Bio-gel P30凝胶过滤纯化复性,用FXa切割,回收目的蛋白,最后用Resource RPC进行纯度验证.结果:融合蛋白的表达量为45%,包涵体复性率为70%以上,抑肽酶纯度为90%,总收率为32%,比活力为3.1 EPU/mg.结论:实现了含抑肽酶融合蛋白的较高表达,复性率及纯度达到较高水平,活力与天然产物相当.

关键词：抑肽酶、凝血因子FXa、融合蛋白、复性

所属期刊栏目：37

分类号：Q815(生物工程学(生物技术))

在线出版日期：2006-09-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：375-378