13-顺维甲酸体外诱导神经母细胞瘤干细胞分化的体外实验

摘要：

目的 体外观察并鉴定13-顺维甲酸诱导神经母细胞瘤(NB)干细胞的分化作用,为临床用维甲酸治疗NB微小残留病灶提供实验依据.方法 取14例伴骨髓转移的Ⅳ期NB患儿的骨髓液标本,分离出NB细胞,将原代肿瘤细胞接种于无血清干细胞培养基中悬浮培养;在含5 μmol·L-1 13-顺维甲酸的分化培养基中培养神经球细胞,观察细胞的形态变化;RT-PCR法检测神经球细胞诱导前、诱导3和9 d Oct-4表达水平的改变;利用细胞免疫荧光技术比较诱导前及诱导9 d神经球细胞nestin表达的差异.结果 14例骨髓标本中,4例分离到原代NB细胞.无血清培养基中培养4～6 d后,可见原代悬浮神经球形成,传代后成球细胞能再次分裂增殖为神经球.神经球细胞在血清培养基中呈贴壁生长,呈三角形或星形,添加5 μmol·L-1 13-顺维甲酸后,细胞生长速度降低,形态发生明显改变.RT-PCR法检测结果显示,13-顺维甲酸诱导9 d后,神经球细胞Oct-4表达水平逐渐降低;细胞免疫荧光显示诱导9 d后神经球细胞nestin表达减弱.结论 13-顺维甲酸能有效诱导NB干细胞分化.

关键词：肿瘤干细胞、13-顺维甲酸、分化、神经母细胞瘤、儿童

所属期刊栏目：5

分类号：R75;R2-

资助基金：上海市科委重点科技支撑计划:08411953700;上海市卫生局课题:2008026

在线出版日期：2010-10-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：382-385