新型冠状病毒中和抗体胶体金测试卡检测不同人群中和抗体的可行性分析

摘要：

目的:比较2种不同原理制备的新型冠状病毒(SARS-CoV-2)中和抗体胶体金测试卡与SARS-CoV-2假病毒中和实验的相关性,评估半定量的中和抗体胶体金测试卡用于不同人群的SARS-CoV-2中和抗体检测的可行性.方法:分别采用厂家A胶体金测试卡(双抗原夹心法)、厂家B胶体金测试卡(竞争阻断法)和SARS-CoV-2假病毒中和法进行检测,比较这2种胶体金方法与中和实验的相关性和敏感度;在确定了测试卡厂家后,检测新型冠状病毒肺炎(COVID-19)疫情暴发前制备的静注人免疫球蛋白及特异性免疫球蛋白,考察其特异性;对ELISA高稀释倍数新冠疫苗免疫后血浆进行原倍和稀释品检测,判断是否有hook效应;检测不同ELISA稀释倍数档位的单份免疫后血浆,判断阳性率,观察色度变化;将ELISA低稀释倍数血浆按照比色卡筛选120NT50和300NT50这2个档位血浆,制备混浆,比较胶体金测试卡与ELISA和中和抗体的相关性.结果:厂家A和厂家B对英国国家生物制品标准化和质量控制研究所(NIBSC)第1代国际标准品20/136(抗SARS-CoV-2人免疫球蛋白国际标准品)的检测限分别为0.6125和5 IU·mL-1;对不同档位的混浆(新冠病毒疫苗免疫后血浆及COVID-19康复者恢复期血浆)的检测结果与中和抗体效价相关性好,检测ELISA高稀释倍数(10000以上)新冠病毒疫苗免疫后血浆未出现hook效应;不同ELISA稀释倍数的单份血浆的阳性率在稀释倍数160以上达到100％,但是色度深浅不一,在稀释倍数640以上色度均一性较高,且色度随着ELISA稀释倍数增高整体逐渐变深.按照比色卡色度筛选的Ppool 120NT50和Ppool 300NT50与中和抗体效价接近.结论:采用双抗原夹心法的厂家A中和抗体测试卡检测COVID-19康复者恢复期血浆和新冠病毒疫苗免疫后血浆的结果与假病毒中和实验效价的相关性优于采用竞争抑制法的厂家B产品及间接ELISA,且检测线的色度深浅与中和抗体水平正相关,可半定量检测用于不同人群的中和抗体筛查.

关键词：新型冠状病毒;中和抗体胶体金测试卡;假病毒中和实验效价;ELISA稀释倍数;检测限;免疫后血浆;康复者恢复期血浆

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分类号：R974(药品)

资助基金：国家科技部重点专项资助项目2020YFC0841800

在线出版日期：2021-10-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1775-1782