肺炎链球菌蛋白PLYd和PsaA的制备与鉴定

摘要：

目的:对2种肺炎链球菌蛋白肺炎链球菌脱毒溶血素(detoxified pneumolysin,PLYd)和肺炎链球菌表面黏附素(pneumococcal surface adhesin A,PsaA)进行全基因合成、重组表达、制备和鉴定.方法:根据GenBank中PLYd,PsaA的基因序列和氨基酸序列,通过密码子优化和全基因合成的方式获得2种蛋白的基因,在PLY基因中引入多位点突变保证表达的蛋白无毒性,构建无标签、高效重组表达菌株,建立2种重组蛋白的纯化制备方法,并进行抗原鉴定及免疫原性检测.结果:人工合成的PLYd,PsaA基因序列经鉴定与预期一致.2种蛋白在大肠杆菌中均获得了高效表达,表达量在40％以上,经2步纯化其纯度均达到95％.2种蛋白均能与阳性血清产生特异性抗原抗体反应,免疫小鼠后均可诱导产生较高水平的蛋白特异性抗体.结论:成功制备2种无标签肺炎链球菌蛋白PLYd,PsaA,且具备与天然抗原相似的抗原性和免疫原性,为开展应用研究奠定基础.

关键词：肺炎链球菌、肺炎链球菌脱毒溶血素、肺炎链球菌表面黏附素、重组表达、免疫原性

所属期刊栏目：26

分类号：R392

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划2012AA02A402

在线出版日期：2017-07-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1266-1271