全血和滤纸干血AS-PCR体系的缓冲液研究

摘要：

目的:研制一种以全血和滤纸干血为模板的等位基因特异性PCR(allele-specific polymerase chain reaction,AS-PCR)体系的缓冲液.方法:采用血样直接作为模板,通过引入错配碱基对AS-PCR的特异性进行改进,研制一种新型缓冲液HPEC[pH 9.5,Mg2+ 3.5 mmol·L-1,海藻糖2.5μmol·L-1,(NH4)2SO49.6mmol·L-1,Tween-20 0.01％],对包含单核苷酸多态性位点(single nucleotide polymorphisms,SNPs)的目的片段进行扩增.结果:该方法成功地实现了以血样和滤纸干血为模板的AS-PCR基因分型.结论:此缓冲液省去了扩增前基因组的提取和纯化,简化了操作过程,降低DNA污染机会和检测技术的复杂性.

关键词：缓冲液、全血扩增、基因诊断

所属期刊栏目：25

分类号：R318(医用一般科学)

资助基金：福建省自然科学基金资助项目2015J01342

在线出版日期：2017-03-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：2876-2880