车前子水提物雌激素样作用筛选及机制探讨
目的:筛选车前子水提物雌激素样活性,并探讨其作用机制.方法:采用小鼠子宫增重实验和人乳腺癌细胞(MCF-7)增殖实验对车前子水提物雌激素样活性进行筛选;接着采用ICI182,780拮抗实验及以pERE-TAL-luc,pβgal-Control,pCXN2-hERα或pCXN2-hERβ共转染的HEK293细胞株为模型,结合ERE调控的报告基因luc瞬时表达检测技术,初探车前子雌激素样作用的机制;运用RT-PCR技术,检测车前子对小鼠子宫中雌激素受体ERα,ERβmRNA表达的影响,探讨车前子发挥雌激素样作用的分子机制.结果:车前子水提物低、高剂量均可显著提高性未成熟雌性小鼠的子宫系数(P<O.01或P<0.05);且能促进MCF-7细胞的增殖(P<0.01或P<0.05),但该促增殖作用可被雌激素受体阻断剂ICI182,780抑制;ERE调控的报告基因瞬时表达结果显示,分别由ERα和ERβ介导时,车前子水提物的标准化荧光素酶活性都显著高于正常组(P<0.01);同时,车前子水提物可以显著增加小鼠子宫中ERαmRNA的表达(P<0.01),也可增加ERβmRNA的表达但与正常组比无统计差异.结论:首次发现车前子具有雌激素样活性,且是通过雌激素受体ERα和ERβ共同介导发挥.车前子在体内发挥雌激素样作用的分子机制可能为促进ERαmRNA的表达.
车前子、雌激素受体、子宫系数、报告基因、RT-PCR
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R931.71;R285.5(生药学(天然药物学))
国家重点基础研究发展计划973计划资助项目2013CB531802
2016-06-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
1191-1196