以IspD为靶点的新型抗结核药物筛选研究

摘要：

目的:筛选靶向结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)2-C-甲基-D-赤藓糖醇-4-磷酸-胞嘧啶转移酶(2-C-methyl-D-erythritol-4-phosphate cytidylyhransferase,IspD)的新型抗结核化合物,研制具有全新作用机制的新型抗多药耐药MTB药物.方法:应用高通量的微生物体外微量、直观快速的药敏试验方法,筛选得到具有抑制MTB生长的阳性化合物;同时在大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)中重组表达MTB的IspD,建立酶活测定方法,构建IspD酶抑制剂筛选模型,从具有抑制MTB生长的阳性化合物中筛选IspD抑制剂;对在酶水平上具有良好抑制活性的化合物进行作用机制研究,确定其对MTB (H37Rv)的最低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC),评价其抗菌谱,测定其对非洲绿猴肾细胞(Vero)和人肝癌细胞(HepG2)的毒性.结果:从4万多个化合物中初步得到了159个具有抑制MTB生长的阳性化合物,从中筛选得到了5个IspD的抑制剂,其中的IMB-4901显示出较好的IspD抑制活性(50％ inhibiting concentration,IC50=19.3 μg· mL-1)和抗MTB活性(MIC=1.6 μg· mL-1).结论:成功获得了以IspD为靶点的新型抗MTB药物先导化合物.

关键词：结核分枝杆菌、2-C-甲基-D-赤藓糖醇-4-磷酸-胞嘧啶转移酶、抑制剂、高通量筛选、抗结核药物

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分类号：R978.3(药品)

资助基金：国家“重大新药创制”科技重大专项2015ZX09304006-009;国家自然科学基金81202567

在线出版日期：2015-10-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1947-1953