流感病毒核酸内切酶抑制剂高通量筛选模型的建立

摘要：

目的:建立适于高通量筛选的流感病毒核酸内切酶(PAN)抑制剂筛选模型.方法:在大肠杆菌中诱导表达质粒,经蛋白纯化和浓缩,得到目的蛋白PAN.提取噬菌体M13K07的单链环状DNA为底物,应用荧光定量方法建立PAN抑制剂高通量筛选体系,并对应用虚拟筛选技术挑选的100个样品进行PAN抑制活性筛选.结果:反应体系在底物质量浓度0.2 μg· mL-1,pH 9.0,Mn2+浓度1 mmol·L-1,37℃温孵60 min的条件下酶活性最佳.此时Z'因子为0.77,可用于高通量筛选.筛选结果发现7个样品对PAN具有抑制活性.结论:本研究建立的流感病毒核酸内切酶抑制剂高通量筛选体系可用于PAN抑制剂的筛选.

关键词：流感病毒、PAN内切酶抑制剂、荧光定量方法、高通量筛选

所属期刊栏目：22

分类号：R965.1(药理学)

资助基金：国家"重大新药创制"科技重大专项2012ZX09301002;北京市自然基金103172

在线出版日期：2013-08-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1137-1142