有限稀释法筛选轮状病毒LD9株纯化方法的建立及应用

摘要：

目的:建立有限稀释法克隆纯化轮状病毒的试验方法,筛选出感染性强、遗传特性稳定的轮状病毒基因重配株LD9.方法:梯度稀释LD9毒种,用5个稀释度(10-4～10-8)的病毒感染铺满单层Vero细胞的96孔板细胞,培养6d,- 20℃冻融,培养物传代至24孔板继续培养6d,显微镜下观察细胞病变(CPE),- 20℃冻融后检测.以相同方法重复克隆纯化3次,筛选获得病毒滴度稳定、具有稳定遗传特性的纯化病毒,由T25、T75到2,4,10层细胞工厂逐级放大培养.结果:筛选出适用于疫苗生产用的遗传特性稳定、感染性强的LD9疫苗候选株.结论:建立了适用于轮状病毒克隆纯化的筛选方法.

关键词：轮状病毒、基因重配株、梯度稀释、筛选、有限稀释法

所属期刊栏目：21

分类号：R186(流行病学与防疫)

资助基金：国家科技支撑计划2008BAI66B08

在线出版日期：2012-07-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1135-1139