野生型DJ-1基因在体外培养SH-SY5Y细胞中高表达对氧化损伤的抑制作用

摘要：

目的:研究帕金森病相关基因野生型DJ-1高表达对鱼藤酮及过氧化氢致多巴胺神经元SH-SY5Y细胞氧化损伤的保护作用及机制.方法:将pcDNA3-FLAG-DJ-1质粒转染进入SH-SY5Y细胞,采用Western blot分析观察DJ-1在细胞内的表达,以2',7'-二氯荧光黄双乙酸盐 (DCFH-DA)作为探针,用流式细胞仪检测鱼藤酮诱导的活性氧水平,以MTT法检测过氧化氢损伤的细胞存活率变化.结果:野生型DJ-1被转染进入SH-SY5Y细胞中,并能高表达.野生型DJ-1的高表达可减少活性氧的生成,0.5μmol·L-1浓度的鱼藤酮处理细胞48 h后,细胞内存在大量活性氧,M2期细胞明显减少(转染野生型DJ-1的SH-SY5Y细胞71.60%与未转染DJ-1的SH-SY5Y细胞89.19%相比).并且可以抑制过氧化氢导致的细胞存活率下降,过氧化氢处理1 h后,野生型DJ-1转染的细胞存活率明显高于未转染者,过氧化氢浓度为0.1,0.2和0.5 mmol·L-1,细胞存活率分别由77.71%,66.28%和39.08%上升至93.01%,83.96%和60.15%.结论:野生型DJ-1基因在体外培养SH-SY5Y细胞中高表达对氧化损伤具有抑制作用,该作用可能与降低细胞内活性氧水平有关.

关键词：帕金森病、野生型DJ-1、抗氧化应激作用

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分类号：R965.1;R742.5(药理学)

资助基金：国家重点基础研究发展计划973计划2004CB518902;国家自然科学基金30472164

在线出版日期：2008-03-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1854-1857