利用哺乳动物细胞双杂交体系研究仙灵骨葆对雌激素受体的作用

摘要：

目的:利用哺乳动物细胞双杂交体系研究仙灵骨葆对雌激素受体(ERs)活性的影响.方法:通过MTT法检测仙灵骨葆对Hela细胞活力的影响,并构建含有ERs配体结合域(LBD)的质粒pCMV-BD及含有报告基因Lusferase的质粒pFR-Luci,将二者与内标质粒pFRTlaczeo共转染到Hela细胞中,形成Gal4DBD-ERa和ERb LBD细胞杂交报告系统.以染料木苷为阳性对照验证本杂交系统,并利用本系统考察仙灵骨葆对ERs活性的影响.结果:仙灵骨葆在25～2 500 ng·mL-1浓度范围内可以促进HeLa细胞的增殖.10μmol·L-1染料木苷可以显著提高Gal4DBD-ERα和ERβ LBD细胞杂交报告系统中ERa和ERb的活性,证明本系统构建成功.仙灵骨葆对ERa具有浓度依赖性的激活作用,2 500 ng·mL-1浓度时ERa的相对荧光活性是DMSO对照组的18倍;仙灵骨葆对ERb也具有一定的激活作用,2 500 ng·mL-1浓度时ERb的相对荧光活性是DMSO对照组的4倍.结论:本研究成功构建了含有雌激素受体配体结合域的细胞杂交系统,仙灵骨葆对该系统的ERs具有激活作用.

关键词：哺乳动物细胞双杂交、仙灵骨葆、雌激素受体、配体结合域、细胞转染

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分类号：R285.4;R289.5(中药学)

在线出版日期：2007-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：2030-2032