去泛素化酶USP37和USP46调控脂质代谢的机制研究

摘要：

目的 探索去泛素化酶USP37和USP46在脂质代谢中的作用.方法 构建固醇调控元件(SRE)荧光素酶报告基因质粒pGL4-SRE-luc,利用去泛素化酶基因表达库筛选去泛素化酶,采用荧光素报告基因检测系统观察去泛素化酶活性对固醇调节元件结合蛋白(SREBP)-1a转录活性的调控作用,免疫共沉淀法检测去泛素化酶和SREBP-la的相互作用.结果 成功构建了 pGI4-SRE-luc,可以响应细胞内低脂应激以及SREBP介导的基因转录.经筛选发现去泛素化酶USP37和USP46能显著上调SRE报告基因荧光素酶活性.与空载体相比,在低脂浓度下USP37能显著上调SRE报告基因荧光素酶活性(P＜0.05),并显著上调硬脂酰CoA去饱和酶(SCD)基因和脂肪酸合酶(FASN)基因的表达(P＜0.05),而其酶活突变克隆USP37 C350S上调作用不显著(P＜0.05),USP37与SREBP-Ia存在相互作用.USP46及其酶活突变克隆USP46-C44S均上调SRE报告基因荧光素酶活性和SREBP下游靶基因SCD的表达(P＜0.05),而USP46与SREBP-la不存在相互作用.结论 USP37可通过去泛素化酶活性影响SREBP下游靶基因调控脂质代谢,而USP46上调部分SREBP下游靶基因的过程不依赖于其去泛素化酶活性.

关键词：胆固醇调节元件结合蛋白质类、去泛素化酶类、脂类代谢

所属期刊栏目：41

分类号：R589.2;R972.6(内分泌腺疾病及代谢病)

资助基金：福州市科技计划项目2019-SZ-1

在线出版日期：2023-01-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：680-685