淫羊藿苷对H2O2诱导的人脐静脉内皮细胞氧化损伤的保护作用及机制

摘要：

目的 研究淫羊藿苷(Ica)对H2O2诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)氧化损伤的保护作用及其机制.方法 H2O2诱导氧化损伤模型.药效学研究分为六组:空白组,模型组(750 μmol· L-1H2O2),Ica-L、M、H组(750 μmol·L-1 H2O2+1×10-8、1×10-7、1×10-6 mol·L-1 Ica)和溶媒组(0.1％ DMSO).Ica给药12h后加入H2O2,Ica作用时间为24、36和48 h.Ica作用机制研究分为五组:空白组、模型组、Ica-H组、LY组(750 μmol·L-1 H2O2+25 μmol·L-1 LY294002)、Ica-H+LY组.LY294002为PI3K抑制剂,给予LY294002后2h加入Ica,12h后加入H2O2,Ica作用时间为48 h.MTT法检测细胞活力,ELISA检测细胞培养液中活性氧(ROS)的含量,显微镜观察细胞形态及存活细胞密度,AnnexinV-FITC/PI染色荧光显微镜观察细胞凋亡率,Real time RT-PCR检测Bcl-2、Bax mRNA的表达,Western Blot检测p-Akt和Akt蛋白的表达.结果 与空白组相比,模型组细胞活力降低(P＜0.O1),ROS分泌量和凋亡细胞增加(P＜0.01);与模型组相比,Ica-L、M、H组均能提高细胞活力(P＜0.01),降低细胞培养液中ROS的含量(P＜0.05),其抑制率呈现时间和剂量依赖性.同时,Ica能明显降低细胞凋亡率(P＜0.01),上调p-Akt蛋白和Bcl-2 mRNA的表达(P＜0.05),下调Bax mRNA的表达(P＜0.05);Ica的以上作用被LY294002拮抗.结论 Ica(1×10-8～1 × 10-6 mol· L-1)对H2O2诱导的HUVEC氧化损伤有保护作用,能缓解氧化应激诱导的HUVEC凋亡,其机制与PI3K/Akt信号通路有关.

关键词：淫羊藿苷、人脐静脉内皮细胞、过氧化氢、氧化损伤

所属期刊栏目：35

分类号：R971(药品)

资助基金：国家科技攻关计划;贵州省教育厅重点招标项目;国家自然科学基金

在线出版日期：2016-03-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：40-45