人乳头瘤病毒18型E7基因和次级淋巴组织趋化因子基因疫苗的制备
目的 以减毒的鼠伤寒沙门菌为载体,制备人乳头瘤病毒(HPV)18型E7基因与次级淋巴组织趋化因子(SLC)基因疫苗.方法 PCR方法扩增HPV 18 E7和SLC基因片段,将其连接至pcDNA3.1(一)载体中,构建重组质粒pcDNA3.1(-)-HPV 18 E7和pcDNA3.1(-)-SLC.酶切及测序鉴定重组质粒.重组质粒转染至小鼠黑色素瘤高转移细胞株B16F10中,RT-PCR和Western blotting方法检测目的基因和蛋白的表达.重组质粒电转化导入减毒鼠伤寒沙门菌SL3261,酶切鉴定重组质粒的正确导入.结果 pcDNA3.1(-)-HPV 18 E7和pcDNA3.1(-)-SLC经相应酶切及测序证实其大小和序列与理论结果一致.HPV 18 E7和SLC在B16F10细胞中正确表达,RT-PCR和Westem blotting所得结果及导入沙门菌SL3261的重组质粒酶切所得片段大小均在理论值范围内.结论 成功制备以沙门菌SL3261为载体的HPV 18 E7和SLC基因疫苗.
人乳头瘤病毒18、趋化因子、CC、疫苗、DNA
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R373.9(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))
湖北省教育厅指导项目13200613001
2010-01-29(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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