TAT蛋白介导生物活性蛋白到达缺血灶的研究

摘要：

目的:以β-半乳糖苷酶(β-Gal)为目的蛋白,观察TAT蛋白介导其到达缺血灶的情况、及有无血脑屏障(BBB)的破坏.方法:构建TAT-β-Gal融合基因表达质粒,转染大肠杆菌BL21(DE3).利用鏊合金属亲合层析法纯化蛋白.将36只SD大鼠随机分为3组.其中2组,采用经颈外动脉血管内直接线栓闭塞法,建立可复流的大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,分别腹腔注射TAT-β-Gal 5 mg·kg-1,β-Gal 5 mg·kg-1,并同时注射Evan's蓝.另一组为假手术组,腹腔注射TAT-β-Gal 5 mg·kg-1.3组分别于给药后30 min,2 h,4 h断头取脑、快速冰冻切片,脑切片间隔行x-Gal及TTC染色.结果:MCAO模型SD大鼠,腹腔注射TAT-β-Gal融合蛋白后,30 min时脑组织各个区域及缺血灶区即可检测到外源性β-Gal的活性,4 h达高峰,同时BBB没有被破坏.而对照组,脑组织各个区域未检测到外源性β-Gal的活性.结论:TAT蛋白能有效地介导生物活性蛋白通过BBB进入缺血灶区在脑组织内达到有效浓度.

关键词：基因、TAT、基因产物、血脑屏障、脑缺血、再灌注、再灌注损伤、TAT融合蛋白

所属期刊栏目：22

分类号：R963(药理学)

资助基金：湖北省教育厅科研项目200A43006

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：172-174