两种去细胞人心脏瓣膜的免疫原性分析
目的 应用组织工程学方法去除人同种心脏瓣膜(HV)的内皮细胞成分或全部细胞成分,比较两种去细胞HV的免疫原性变化.方法 采用低渗液-去污剂(1％ Triton)-核酸酶”1 μg/ml核糖核酸酶(RNase)和10μg/ml去氧核糖核酸酶(DNase)”去细胞法去除HV表面的内皮细胞成分,保留间质细胞及细胞外基质结构的完整性;采用低渗液-去污剂(1％去氧胆酸)-核酸酶”20 μg/ml RNase和200 μg/ml DNase”去细胞法去除HV组织中所有细胞成分,保留完整的细胞外基质.免疫组织化学方法测定HLA-DR抗原在HV组织中的表达;行大鼠皮下移植试验,组织学评价及定性、定量分析组织的钙化程度.结果 免疫组织化学结果证实HV去内皮细胞和去全部细胞后组织中HLA-DR抗原表达均下降,但去全部细胞HV的HLA-DR抗原表达下降更为显著.大鼠皮下移植实验结果表明深低温液氮保存HV和去内皮细胞HV组织中有大量炎性细胞浸润,以淋巴细胞为著,管壁组织更为显著;去全部细胞HV炎性反应较轻,仅组织边缘有少量炎性细胞浸润.钙盐染色深低温液氮保存HV和去内皮细胞HV组织中可见钙盐沉积,呈现大量黑色颗粒,管壁组织更为显著;而去全部细胞HV组织中钙盐沉积极少.原子吸收光谱法定量分析结果表明去全部细胞HV组织中钙离子含量明显低于去内皮细胞HV和深低温液氮保存HV (P＜0.05),后两者差异无统计学意义(P＞0.05).结论 去全部细胞HV组织免疫原性显著下降,移植后炎性反应和组织钙化程度显著减轻.去内皮细胞HV组织免疫原性及移植后炎性反应有所下降,但移植后组织钙化程度仍显著增高,且管壁组织钙盐含量增高较瓣叶组织更加显著,提示组织中大量的间质细胞可能是参与HV移植后免疫反应、导致HV移植后钙化毁损的主要组织成份.
同种心脏瓣膜、免疫原性、去细胞、钙化、人
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2015-06-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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