基于接头序列"GSGGSG"的细粒棘球蚴病重组多表位疫苗EgG1Y162-2(4)的制备及鉴定

摘要：

目的 对细粒棘球蚴病重组多表位疫苗EgG1Y162-2(4)进行原核表达并初步鉴定.方法 利用免疫信息学方法对基于接头序列"GSGGSG"的细粒棘球蚴病重组多表位疫苗EgG1Y162-2(4)进行三维结构建模,分析其结构变化并评估该疫苗抗原性.通过EcoR Ⅰ和Sal Ⅰ双酶切构建pET30a-EgG1Y162-2(4)重组质粒,将重组质粒转化入感受态细胞,利用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl-β-D-thiogalactoside,IPTG)诱导蛋白表达,Western blotting鉴定原核表达蛋白产物,并应用细粒棘球蚴病患者及健康人血清分析重组蛋白抗原性.结果 构建的重组疫苗EgG1Y162-2(4)三维结构串联的4个EgG1Y162-2蛋白均能独立、有效表达且具有良好抗原性.重组质粒pET30a-EgG1Y162-2(4)在0.2 mmol/L IPTG 37℃诱导4 h条件下,上清中目的蛋白表达量最高,使用60 mmol/L咪唑洗脱的蛋白成分较纯.Western blotting分析发现,重组多表位蛋白HIS-EgG1Y162-2(4)在约39 kDa位置处出现条带,且该蛋白可被细粒棘球蚴病患者血清识别.结论 成功构建了细粒棘球蚴重组疫苗EgG1Y162-2(4),为研究细粒棘球蚴病重组多表位疫苗奠定了基础.

关键词：细粒棘球蚴病、接头序列、多表位疫苗、EgG1Y162-2(4)、原核表达、鉴定

所属期刊栏目：34

分类号：R532.32(寄生虫病)

资助基金：国家自然科学基金;新疆维吾尔自治区自然科学基金

在线出版日期：2022-10-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：378-382,416