PD-1/PD-L1在弓形虫感染小鼠妊娠中晚期的表达及与IFN-γ的相互调节作用
目的 探讨程序性死亡蛋白(programmed death protein-1,PD-1)及其配体PD-L1在小鼠妊娠早期弓形虫感染后母胎界面的动态表达,及其与γ干扰素(interferon-γ,IFN-γ)的相互调节作用.方法 将20只孕0 d母鼠随机平均分为4组,即孕12 d对照组(12 dpn组)、孕12 d感染组(12 dpi组)和孕18 d对照组(18 dpn组)、感染组(18 dpi组).在妊娠第6天时对12 dpi组、18 dpi组孕鼠给予150个弓形虫PRU株速殖子腹腔注射,12 dpn组、18 dpn组孕鼠则注射等量PBS.于小鼠妊娠第12天和第18天分别处死4组小鼠,计数胎盘、胎儿数量并称重.取各组孕鼠胎盘和子宫组织观察其组织病理变化,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测胎盘、子宫组织中PD-1与PD-L1、弓形虫表面抗原SAG-l及细胞因子IFN-γmRNA表达水平,并分析PD-l与IFN-y表达的相关性.设置12 dpn、12 dpi、18 dpn、18 dpi组以及12 dpi PBS阴性对照组、18 dpi PBS阴性对照组,采用免疫组织化学染色检测孕鼠子宫、胎盘组织中PD-1表达水平.结果 12 dpi组和18 dpi组孕鼠均出现胎盘和胎儿发育不良等不良妊娠结局,且胎盘重量和胎儿体质量均低于12 dpn组、18 dpn组(t=5.52、11.44、12.63、11.67,P均＜0.01).组织病理观察结果显示,12 dpi组和18 dpi组孕鼠胎盘组织蜕膜及连接区连接疏松,胎盘及子宫组织中均见大量炎性细胞浸润和淤血.经qPCR检测发现,12 dpn、12 dpi、18 dpn组和18 dpi组小鼠胎盘和子宫组织中 PD-1、PD-L1、IFN-y 和SAG-1表达均存在差异(F=22.48、51.23、9.61、47.49、16.08、21.52、28.66、238.90,P均＜0.05),其中12 dpi组小鼠胎盘(P均＜0.05)及子宫组织中(P均＜0.05)中PD-1、PD-L1、IFN-y和SAG-l表达水平均较12 dpn组升高.与18 dpn组相比,18 dpi组小鼠胎盘组织中PD-1和PD-L1表达水平均下降(P均＜0.05),胎盘和子宫组织中IFN-γ和SAG-1表达水平均升高(P均＜0.05).与12 dpi组相比,18 dpi组孕鼠胎盘和子宫中PD-1和PD-L1表达水平均下降(P均＜0.05).免疫组化染色结果显示,PD-1在12dpi组孕鼠胎盘组织中浸润的炎性细胞上有表达,在18 dpi组中表达不明显;PD-1在12dpi组孕鼠子宫上皮呈强阳性表达,而在18 dpi组呈弱阳性表达.相关分析结果显示,12dpi组孕鼠胎盘(r,=0.99,P＜0.01)、子宫(r,=0.97,P＜0.01),18 dpi组孕鼠胎盘(rs=0.82,P＜0.05)、子宫(rs=0.81,P＜0.05)中IFN-y与PD-1mRNA表达水平均呈正相关.结论 小鼠妊娠早期感染弓形虫后,胎盘和子宫中PD-1/PD-L1表达呈孕中期显著上升、孕晚期下降的动态变化,且与同期IFN-γ表达趋势一致,其中PD-1与IFN-γ表达呈正相关;故推测在孕鼠妊娠中、晚期,母胎界面PD-1/PD-L1通路与弓形虫感染所诱导的IFN-γ有相互调节关系.
刚地弓形虫、妊娠、小鼠、PD-1/PD-L1、γ干扰素
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R382.5(医学寄生虫学)
国家自然科学基金;广西自然科学基金
2021-06-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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