弓形虫磷酸丙糖异构酶原核表达及免疫保护的初步研究

摘要：

目的 克隆刚地弓形虫磷酸丙糖异构酶(Triosephosphate isomerase,TPI)基因,原核表达和纯化蛋白,研究其对弓形虫感染小鼠的免疫保护作用.方法 抽提弓形虫速殖子总RNA,利用PCR技术扩增刚地弓形虫TPI基因,构建重组原核表达载体TPI/pET-28a(+),转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导目的蛋白表达,镍亲和层析法纯化目的蛋白.将与佐剂乳化后的TPI蛋白对小鼠颈背部多点皮内免疫,间隔2周,连续免疫4次,最后一次为加强免疫,同时设置佐剂对照组与正常对照组.尾静脉采血检测小鼠血清抗体效价.以400个弓形虫速殖子/只接种小鼠腹腔,观察记录各组小鼠的生存率.结果 成功扩增到弓形虫TPI基因,构建原核表达载体TPI/pET-28a(+),获得纯化的TPI蛋白,TPI免疫4次后的小鼠血清抗体效价可达1:100000以上,且生存期显著高于佐剂对照组与正常对照组.结论 弓形虫TPI蛋白对弓形虫感染小鼠具有一定的免疫保护作用,为研究弓形虫疫苗奠定了理论基础.

关键词：刚地弓形虫、磷酸丙糖异构酶、原核表达、免疫保护

所属期刊栏目：29

分类号：R382.5(医学寄生虫学)

资助基金：2017年上海健康医学院师资人才百人库其他类项目;无锡市科技局科技创新与产业升级引导资金项目CSE31N1518;江南大学公共卫生研究中心资助;江苏省公益类科研院所能力提升项目BM2015024;江苏省"科教强卫工程"项目

在线出版日期：2018-01-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：780-783