疟疾巢式PCR检测方法的优化应用

摘要：

目的 结合疟疾检测工作实际,对疟疾基因检测的巢式PCR方法进行优化应用,以提高疟疾检测效率.方法通过采用PCR预混液、内引物一步扩增、重新设计针对卵形疟多个亚种的新引物,在疟疾巢式PCR的基础对反应体系、反应条件和卵形疟原虫特异性引物进行优化.对优化后的方法进行特异性和敏感性分析,并用巢式PCR和优化后的方法同时对疟疾阳性血样和疟疾送检血样进行检测,对检测结果进行比较分析.结果优化后的方法特异性较好,敏感性可达pg至fg级.两种方法同时检测疟疾阳性血样的结果表明,优化后的方法PCR扩增产物的产量无明显变化,非特异性扩增明显减少,卵形疟不同亚种的检出率提高,总体特异性提高.对111份疟疾送检血样的实测结果表明,巢式PCR的敏感性和虫种特异性分别为94.57％和86.96％,优化后方法的敏感性和虫种特异性均为93.48％,两种方法敏感性差异无统计学意义(P>0.05),但优化后的方法特异性明显提高(P<0.05).结论优化后的PCR检测在保持常规巢式PCR方法敏感性的基础上提高了特异性,同时因其实验环节减少而节省了检测成本、提高了检测效率.

关键词：疟疾、巢式PCR、卵形疟原虫、优化应用、敏感性、特异性

所属期刊栏目：29

分类号：R531.3(寄生虫病)

在线出版日期：2017-09-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：449-453,463