3种方法提取湖北钉螺RNA的比较
目的 比较改良SDS法、TRIzol法和CTAB法对湖北钉螺RNA的提取效果,以期获得一种经济、高效,适于湖北钉螺大样本RNA的制备方法.方法 采用改良SDS法、TRIzol法和CTAB法分别提取湖北钉螺RNA,利用核酸蛋白分析仪测定RNA浓度和纯度,通过浓度计算产率,纯度以A260/A280、A260/A230表示;以1%琼脂糖凝胶电泳进一步检验RNA完整性;以β-acting为目的基因进行RT-PCR,验证提取的RNA能否满足RT-PCR的实验要求.结果 经方差分析,3种方法的产率差异具有统计学意义(F=16895.85,P<0.01);经LSD检验,改良SDS法产率较高,其次为TRIzol法,CTAB法产率较低.CTAB法提取的RNA纯度较高,A260/A280、A260/A230分别在1.8~2.0和2.0~2.2之间,其余两种方法的A260/A230均低于2.0.改良SDS法提取的RNA完整性较好,电泳结果显示28S、18S和5S条带完整清晰,条带之间无明显弥散现象;而TRIzol法未见28S条带,CTAB法仅见18S条带.3种方法提取的RNA经RT-PCR均能扩增出阳性条带.相比另外两种方法,改良SDS法成本低、耗时少.结论 改良SDS法是一种经济、高效,适于湖北钉螺大样本RNA的制备方法.
湖北钉螺、RNA提取、改良SDS法、TRIzol法、CTAB法、RNA质量
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R383.24(医学寄生虫学)
安徽省高校优秀青年人才支持计划重点项目gxyqZD2016174;安徽省高校自然科学研究重点项目KJ2016A725;安徽省大学生创新创业项目201510368073、201510368059
2017-07-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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