湖北钉螺髓样分化因子88的鉴定及其在抗血吸虫感染固有免疫中的地位
目的 克隆、鉴定湖北钉螺(Oncomelania hupensis)髓样分化因子88(MyD88)基因,并通过观察感染日本血吸虫前后钉螺各组织中MyD88 mRNA表达水平的变化,探讨其在抗血吸虫感染固有免疫中的地位.方法 通过cDNA末端快速扩增技术(Rapid amplification of cDNA ends,RACE)获取湖北钉螺MyD88全长cDNA序列,预测其蛋白结构域,并进行多序列比对及保守区域分析,构建系统进化树.使用实时荧光定量PCR(Real-time quantitative PCR,RT-qPCR)技术检测MyD88基因在血吸虫感染前后钉螺各组织中的表达变化.结果 湖北钉螺MyD88全长cDNA开放阅读框(Open read-ing frame,ORF)1406 bp,编码468个氨基酸,蛋白N端和C端分别存在死亡结构域和TIR(Toll/interlrukin-1 receptor,TIR)结构域.与其他软体类MyD88氨基酸序列比对,相似性为38%~52%;系统进化树提示钉螺MyD88和光滑双脐螺MyD88起源于共同的祖先基因.qPCR结果显示,检测的所有组织中均有MyD88 mRNA的表达,其中血淋巴细胞中表达最为丰富.感染日本血吸虫后,除钉螺头足外,MyD88 mRNA在肝脏、生殖腺、血淋巴细胞等组织中均有上调表达,以血淋巴细胞中上调表达最显著.结论 湖北钉螺存在依赖MyD88的TLRs(Toll-like receptors,TLRs)信号通路,MyD88分子可能在钉螺对抗日本血吸虫感染的固有免疫中发挥重要作用.
湖北钉螺、日本血吸虫、固有免疫、TLR信号通路、髓样分化因子88
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R383.24(医学寄生虫学)
国家自然科学基金81401685;湖北省卫生和计划生育委员会血防专项WJ2015XB008
2017-05-04(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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