弓形虫棒状体蛋白ROP38的原核表达与鉴定
目的:原核表达弓形虫棒状体蛋白ROP38,并对重组蛋白rROP38的反应原性进行鉴定。方法根据已发表的ROP38基因序列设计引物,通过RT?PCR方法扩增弓形虫RH株的ROP38基因。将ROP38部分基因克隆到原核表达载体pET?28a(+)后,重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,IPTG诱导表达并优化表达条件,SDS?PAGE分析表达情况,并通过Western blot鉴定其反应原性。结果 SDS?PAGE显示在上清和包涵体均有rROP38表达,分子量约为43 kD。Western blot结果显示,rROP38蛋白能被His标签抗体和感染弓形虫的人阳性血清识别,说明ROP38具有良好的反应原性,可以作为潜在的血清学诊断抗原。结论本研究成功获得了具有良好反应原性的弓形虫重组蛋白rROP38。
弓形虫、棒状体蛋白38、原核表达、纳虫空泡
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R531.8(寄生虫病)
国家自然基金青年项目31502057、81501770
2016-11-02(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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