基于恶性疟原虫PHIST特有基因的环介导等温扩增技术的建立与评价
目的：建立基于编码恶性疟原虫PHIST蛋白特有基因的环介导等温扩增技术。方法在PlasmoDB数据库中，搜索并筛选编码PHIST、在环状体或裂殖体期高表达且恶性疟原虫特有的基因。利用在线软件PrimerExplorer V4设计目的基因LAMP引物。采集恶性疟原虫滤纸血并提取基因组DNA。将提取后的恶性疟原虫DNA用超纯水进行10?1、10?2、10?3、10?4倍比稀释，用LAMP法检测其敏感性；采用间日疟原虫、约氏疟原虫、牛带绦虫和日本血吸虫基因组DNA作为对照，用LAMP法评价其特异性。结果共筛选出61个编码恶性疟原虫PHIST的基因。选取环状体期高表达的特有基因PF3D7_1372300和裂殖体期高表达的特有基因 PF3D7_1401600建立 LAMP 技术。基于 PF3D7_1372300和 PF3D7_1401600基因的LAMP 法检测恶性疟原虫的最低限度分别为130.5个/μl和1305.3个/μl，所获得的恶性疟原虫扩增产物其检测管染色后呈绿色，即阳性。基于PF3D7_1372300和PF3D7_1401600基因的LAMP法扩增恶性疟原虫产物检测管染色后呈绿色，即阳性；而间日疟原虫、约氏疟原虫、牛带绦虫和日本血吸虫的LAMP扩增产物检测管染色后仍呈棕色，即阴性。结论基于PF3D7_1372300基因的LAMP法检测恶性疟原虫敏感、特异、简便、实用，可用于恶性疟流行区现场调查和临床诊断。
恶性疟原虫、PHIST蛋白、环介导等温扩增技术
R382.31(医学寄生虫学)
湖北省自然科学基金2014CFB648
2016-03-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共7页
39-44,50
